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黄曲霉毒素B1降解酶的分离纯化及其酶学特性

阅读:
2017-06-07 来源:食品科学网
责任编辑:食品科学
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  作者:杨文华,李海星,刘晓华,曹郁生

  关键词:施氏假单胞菌F4;黄曲霉毒素B1降解酶;分离纯化;特性

  内容:施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)F4能产生黄曲霉毒素B1的降解酶(aflatoxin B1-degrading enzyme,ADE),本实验通过3 步法提取纯化ADE,即包括硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析和SephadexG-100凝胶过滤层析。结果表明,通过以上纯化方法,ADE的回收率为56%,纯化的ADE比活力为6.4×104 U/mg,纯化了123 倍。利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得ADE分子质量约为24 kD;ADE与AFB1反应的最适温度和pH值分别为30 ℃和6.0;Cu2+对ADE酶活性有抑制作用;利用双倒数作图法测得ADE表观Km值为5.61×10-5 mol/L。

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