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稠李花色苷酶法制备及对H2O2诱导大鼠胰岛素瘤细胞损伤的保护作用

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2017-06-07 来源:食品科学网
责任编辑:食品科学
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  作者:刘 晓,曹向宇,李其久,孙宇航,杨思敏,于 慧,王纬宇,刘剑利

  关键词:花色苷;酶法;氧化损伤;保护;大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞

  内容:目的:探究纤维素酶酶法制备稠李花色苷的最佳条件,并研究制备的稠李花色苷对H2O2诱导的大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞损伤的保护作用。方法:通过单因素试验和正交试验,优化得到酶法制备稠李花色苷的最佳条件;稠李花色苷处理大鼠Ins-1细胞,进行形态学观察、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]细胞活力实验、2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针法检测细胞内活性氧实验研究稠李花色苷对H2O2诱导损伤的Ins-1细胞保护作用。结果:纤维素酶法提取稠李花色苷的最佳条件为:温度60 ℃、纤维素酶添加量9 mg/g、料液比1∶35(g/mL)、pH 3.5,此条件下稠李花色苷得率为(0.956±0.027) mg/g;形态学观察及MTT细胞活力实验显示,稠李花色苷对H2O2诱导损伤的Ins-1细胞具有较强的保护作用,DCFH-DA法检测细胞内活性氧实验说明,稠李花色苷能够显著地清除Ins-1细胞内的活性氧。结论:纤维素酶法制备稠李花色苷是一种有效的方法,制备的稠李花色苷对H2O2诱导的大鼠Ins-1细胞损伤具有较强的保护作用。

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