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同源重组法构建副干酪乳杆菌组氨酸蛋白激酶基因缺失突变株

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2017-07-24 来源:食品科学网
责任编辑:食品科学
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  作者:岳元春,王 洋,由田,高冬妮,平文祥,葛菁萍 

  关键词:副干酪乳杆菌;细菌素;组氨酸蛋白激酶基因;同源重组

  内容:构建副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)组氨酸蛋白激酶prcK基因缺失突变株,为prcK基因功能研究提供实验工具。采用同源重组技术构建质粒pKLKRT(含prcK::Tetr基因),将其电转化进入L. paracasei HD1.7中,使prcK::Tetr基因同源重组到L. paracasei HD1.7的染色体上,通过四环素耐药、氨苄青霉素敏感等特性筛选出含有prcK::Tetr基因的新L. paracasei HD1.7。结果表明,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证及酶切验证后确定质粒pKLKRT构建成功,并成功转化入L. paracasei HD1.7中,经PCR确认L. paracasei HD1.7 prcK基因缺失突变株构建成功。该突变株产生的细菌素效价比出发菌株低23.61%。采用同源重组方法成功构建L. paracasei HD1.7 prcK基因缺失突变株,为研究L. paracasei HD1.7群体效应相关基因的分子机理奠定基础。

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