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巴氏葡萄球菌TS-82类胡萝卜素裂解酶的分离纯化及其酶学特性

阅读:
2017-07-24 来源:食品科学网
责任编辑:食品科学
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  作者:朱明明,樊明涛,何鸿举,马汉军

  关键词:巴氏葡萄球菌TS-82;类胡萝卜素裂解酶;类胡萝卜素;分离纯化;酶学特性

  内容:巴氏葡萄球菌TS-82类胡萝卜素裂解酶经强阴离子柱、高效制备液相色谱和多肽分子筛纯化得到液相级纯酶(95.6%)。该酶比活力为125 U/g,纯化倍数为446,回收率为2.39%。纯化后的类胡萝卜素裂解酶经液相色谱-质谱联用测定,得其分子质量为655.093 D。关于酶学特性,研究发现该酶对C40类胡萝卜素底物的最适温度为60 ℃,而作用于β-阿朴-8¡¯-胡萝卜醛的最适温度是50 ℃,该酶的稳定温度为50 ℃以下;该酶对所测定底物的最适pH值为3.0;该酶与5 种底物亲和力排列为:玉米黄质>虾青素>β-胡萝卜素>角黄质>β-阿朴-8¡¯-胡萝卜醛;Al3+和Fe3+是该酶的强效催化剂,Fe2+是该酶的强效抑制剂;H2O2在低浓度范围内(0~16 mmol/L)可促进酶活性;低体积分数乙醇(4%~16%)的添加对酶活性无明显抑制作用。结果表明该酶具有很好的耐酸性和热稳定性,能够适应果酒环境,为其工业化应用提供依据。

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