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应用微滴式数字聚合酶链式反应定量检测牛肉制品中的猪源性成分

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2019-09-26 来源:食品科学网
责任编辑:食品科学
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  作者:刘立兵,石蕊寒,项佳林,孙晓霞,付 琦,王金凤,周 巍,王素华,郭春海,王建昌

  关键词:微滴式数字聚合酶链式反应|牛肉|猪肉|定量检测

  内容:参照GB/T 25165—2010《明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法 实时荧光聚合酶链式反应法》,以牛的生长激素(growth hormone,GH)基因和猪的朊蛋白(prion protein,PRNP)基因2 种核基因为靶基因合成特异性引物和探针。理论推导单位质量牛肉的GH基因与猪肉PRNP基因拷贝数之比为一固定值,通过微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)方法对该固定值进行检测和验证,并以该固定值对牛肉/猪肉人工混合样本和市售牛肉制品中的猪肉成分进行定量检测。结果表明:该方法具有良好的准确性及可重复性;牛肉中掺杂猪肉质量分数在5%~99%范围内时,检测结果绝对误差小于1.28%,变异系数小于6.5%,猪肉成分的回收率为99.09%~102.80%;20 份牛肉制品中,4 份检出猪肉成分,其中3 份的相对含量为29.19%~98.15%,1 份为0.12%(低于本方法检出限5%)。因此,ddPCR方法可以较好地应用于牛肉制品中掺杂猪肉成分的定量检测。

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