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木瓜蛋白酶具有水解壳聚糖活性的酶组分分离纯化

阅读:
2017-06-07 来源:食品科学网
责任编辑:食品科学
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  作者:陈季旺,谭 晶,夏文水

  关键词:木瓜蛋白酶|壳聚糖酶活力|超滤|制备电泳|高效液相色谱/质谱/质谱(HPLC-MS/MS)

  内容:采用超滤、制备电泳对木瓜蛋白酶进行分离纯化。结果显示:超滤后木瓜蛋白酶的蛋白酶和壳聚糖酶比活力分别从435.10U/mg 和2.17U/mg 提高到531.39U/mg 和2.65U/mg,纯化倍数均提高了1.22 倍。制备电泳图谱上显示有五条明显的酶条带,酶活性测定显示条带2 具有较高的壳聚糖酶比活力。采用SDS-PAGE 和HPLC 对此纯化酶组分进行纯度鉴定,结果显示为单一条带和单一峰,说明木瓜蛋白酶中存在具有水解壳聚糖活力的酶组分。HPLCMS/MS 测定该纯化酶组分的氨基酸序列为 MRITISGSPG SGTTTLGRSI AEKYSYRYVS AGEVFRGLAKERNMDLAAFG KIAETDPAID LEIADARQKEI GESSDDIILE GRLAGWMVEN ADLKILLCAS PECRSTRIAAREGLTEKQAF EMTIEREACE AGRYMEYYEI DILDFSPYDL ILNSETFSAN ELFAIVDAAV SSLLKRE。

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