不同细菌间的交互作用影响混合菌膜的形成，本报告以大肠杆菌（Escherichia coli）O157:H7和食品中常见腐败菌假单胞菌（Pseudomonas spp.）为对象，首先研究两菌不同菌株混合菌膜形成时（25 ℃、72 h）交互作用。进一步选取代表菌株研究混合菌膜形成过程中菌膜量、胞外聚合物（extracellular polymeric substances，EPS）构成、微观结构及O157毒力基因表达变化。选择性培养计数发现，4 株假单胞菌的菌膜形成基本受到3 株E. coli O157:H7显著抑制（P < 0.05），而E. coli O157:H7菌膜形成未受影响或受到假单胞菌抑制。两菌代表菌株混合成膜168 h，平板计数发现两菌基本呈现相互拮抗。EPS含量变化、扫描电子显微镜和共聚焦激光扫描显微镜的结果表明，微观结构变化与平板计数生物菌膜量变化一致，也表现出相互抑制。反转录定量聚合酶链式反应分析发现，120 h时单种和混合菌膜中ATCC43895单位菌数毒力基因（stx1、stx2、hly和eae）表达量均显著低于72 h（P＜0.05）。混合菌膜中4 种毒力基因单位面积与单位菌数的表达量均显著低于单种菌膜，表明混合成膜时假单胞菌抑制了E. coli O157:H7菌体毒力基因表达。本研究可为揭示有害菌混合菌膜形成规律及进一步风险防控提供科学依据。