聚合度为3-7的壳寡糖具有更好的生物活性，而酶法降解壳聚糖制备壳寡糖的聚合度通常为2-4。酶的工业化应用的关键是固定化，但繁琐、费时费力的酶纯化过程、昂贵的载体、有毒有机化合物的引入及酶自身的不稳定性仍然是限制酶固定化工业应用的主要瓶颈。

在该研究中，研究人员前期筛选到来自于烟曲霉Aspergillus fumigatus CJ22-326的壳聚糖酶，其具有不能切割壳二糖、壳三糖和壳四糖，并且很难切割壳五糖的特点。通过在Csn75的C端融合来源于嗜盐芽孢杆菌（Bacillus halodurans）的β-（1,3）-葡聚糖酶的可特异性亲和热凝胶多糖的碳水化合物结合结构域（Carbohydrate Binding Module，CBM），获得了具有“结合”和“催化”双功能的融合酶Csn75-CBM。一步纯化、固定化制备了热凝胶多糖壳聚糖酶填充床反应器（Chitosanase Immobilized Curdlan Packed-Bed Reactor，CICPR）。通过控制酶的加载量、底物浓度和流速，利用CICPR制备了DP分别为：2-5、3-6和3-7的壳寡糖，相应的水解率分别为：97.75%、75.45%、75.45%。采用每4 h补料Csn75-CBM粗酶液实现原位CICPR更新，使水解产物中壳寡糖稳定产出。

余晓斌 教授

江南大学生物工程学院

教授、博导，长期从事发酵健康食品酿造，植物、中草药高值化转化、酶技术的研究，主要承担《发酵食品》、《酶与酶工程》等课程的讲授工作。近年来共发表高水平研究论文200多篇，参与出版专著（或教材）2部；申请发明专利26项，授权发明专利9项，授权实用新型专利2项；主持包括国家863，自然科学基金、江苏省重大成果转化、省产学研等在内的省部级科研项目8项；获得江苏省科技进步二等奖1项（2014年，省科技厅），指导学生获得2014年江苏省优秀硕士论文奖。现为国家食品药品监督管理局保健食品评审专家，全国饲料评审委员会委员，江苏省食协营养保健品专业委员会理事。