以黑木耳为供试样品，系统考察了HPLC指纹图谱的色谱条件（不同色谱柱、流动相系统、洗脱梯度、柱温、检测波长等）及供试品溶液制备方法（不同提取溶剂、料液比、提取方法、超声时间），建立了基于小分子化学成分的食用菌HPLC-UV指纹图谱分析方法，并对方法学的精密度、重复性及稳定性等进行了验证。

特征峰及相似度分析

特征峰及相似度分析结果（图1和表1）表明，黑木耳有9个共有峰，毛木耳有11个共有峰，玉木耳有6个共有峰，银耳有9个共有峰，四种食用菌之间有5个共有峰；四种食用菌种内相似度均大于0.95，但不同食用菌之间的相似度差异较大，尤其是银耳与其他3种食用菌相似度相对较低（介于0.326~0.491之间），而黑木耳、毛木耳和玉木耳则更为相似（介于0.691~0.877之间），说明同一种食用菌虽然产地不同，但其小分子化学成分总体差异不大，而不同食用菌之间的化学成分存在一定差异，且与它们的遗传关系相吻合。

图1 四种食用菌的对照指纹图谱 A. 黑木耳, B. 毛木耳, C. 玉木耳, D. 银耳

表 1 四种食用菌的种内和种间相似度

聚类分析（HCA）

HCA结果（图2）表明，黑木耳与其他3种食用菌的区分最为明显，银耳次之，而毛木耳和玉木耳的数据则有一定混杂，可能是由于玉木耳是毛木耳的白色变种，基原接近，因此其成分具有更多的相似性。

图2 四种食用菌的HCA分析图 A. 黑木耳, B. 毛木耳, C. 玉木耳, D. 银耳

主成分分析（PCA）

PCA结果（图3）表明，黑木耳、毛木耳、玉木耳和银耳四种食用菌可以明显区分开来，其中黑木耳分布较散，毛木耳次之，玉木耳和银耳分布则非常紧凑，其原因应该和产地及种植方式的多样性相关。黑木耳、毛木耳在我国有着历史悠久的食用和种植历史，目前在我国多地都有人工种植，且其产区分布较为复杂，样品受地域及人工因素的影响较大；玉木耳在我国的种植时间较短，产区较少，样品指纹图谱的一致性较好；而银耳在我国有着历史悠久的食用和种植历史，其人工栽培目前以福建古田县最为著名，且古田县是全国人工栽培银耳的发源地和主产区，主产区固定使得其指纹图谱的一致性也较好。

图2 四种食用菌的PCA得分图 A. 黑木耳, B. 毛木耳, C. 玉木耳, D. 银耳

HPLC指纹图谱和模式识别分析方法相结合不仅可以整体表征黑木耳、毛木耳、玉木耳和银耳的小分子成分，而且能够对不同食用菌进行有效区分。但值得注意的是，不同模式识别分析方法所得结果可能有所不同。