有机酸

化合物1的母离子为m/z 191，其有特征碎片离子m/z 111，被鉴定为柠檬酸。化合物3被鉴定为酒石酸，因其裂解过程中产生了特征碎片离子m/z 165和m/z 193。化合物12含有碎片离子m/z 125，表明其含有—COOH，被鉴定为壬二酸。

酚类化合物

化合物4的分子式为C18H12O9，其含有特征碎片离子m/z 124、149和246，推测为鹅掌菜酚。化合物20被鉴定为6-姜酚。化合物27有碎片离子m/z 162、277和321，表示其含有2 个—OH、—CH3和—C4H9，被推测为2,2′-亚甲基双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)。

萜类化合物

化合物9含有特征碎片离子m/z 225、433和451，被鉴定为茯苓酸A。

黄酮类化合物

化合物10含有m/z 301的碎片离子，被鉴定为槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸。化合物16通过和Massbank数据库比对而被鉴定为芒柄花黄素。化合物23产生了碎片离子m/z 275（C₁₇H₂₃O₃）、161（C₉H₅O₃）、151和137，表明其含有—C9H16和—C9H15—CH3，被鉴定为次苦参黄素。化合物20的分子质量比化合物23的分子质量高16 Da，表示其比化合物42多一个羟基，被鉴定为苦参醇N。

酚酸类化合物

化合物 1 1 有 m/z 562 （-162 Da ） 、 546（-180 Da）、383（-359 Da）和365（－18 Da）等特征碎片离子，表示该化合物脱去了一分子咖啡酰基、水和二十六烷，被鉴定为咖啡酸二十六酯己糖。根据文献报道的特征离子碎片，化合物17被鉴定为二羟基苯甲酸衍生物，其特征碎片离子m/z 151表明其有二羟基苯甲酸结构。

脂肪酸

化合物13含有脂氧化物特征离子碎片m/z 171和m/z 211，因而被鉴定为三羟基十八碳二烯酸。化合物14的分子式为C₁₈H₃₄O₅，含有特征离子碎片m/z 171、211和229，它被推测为三羟基十八烯酸。化合物28和29是饱和脂肪酸，其含有特征碎片离子m/z 255（C₁₆H₃₂O₂）和m/z 283（C₁₈H₃₆O₂），因此它们分别被鉴定为棕榈酸和硬脂酸。

其他化合物

如图3A所示，海蒿子提取物各多酚组分对DPPH自由基的清除能力均随质量浓度的提高而不断增强，呈现出明显的剂量效应。GP的DPPH自由基清除能力最强，其IC₅₀值为84.60 μg/mL，略高于抗坏血酸。FP和EP的IC₅₀值分别为187.91 μg/mL和128.1 μg/mL，两者之间存在显著性差异。上述结果表明海蒿子提取物的3 个多酚组分均有很好的DPPH自由基清除能力，且结合酚组分活性显著强于游离酚组分，这可能是因为GP和EP的总酚和总黄酮含量更高。

如图3B所示，FP、EP和GP对ABTS阳离子自由基清除能力的IC₅₀值分别为262.15、220.55 μg/mL和127.01 μg/mL，显著高于槲皮素（19.46 μg/mL）。海蒿子提取物3 个多酚组分对ABTS阳离子自由基和DPPH自由基清除能力的强弱顺序一致。

如 图 3C 所示，海蒿子提取物各多酚组分均有很强的氧自由基吸收能力。EP的ORAC值最高，为5322.85 μmol/g；FP次之，为2890.84 μmol/g；GP最弱，为1446.36 μmol/g。EP的总黄酮含量显著高于其他2 个组分，从其中共鉴定出4个黄酮，而FP和GP均只有1个黄酮，表明海蒿子中黄酮对氧自由基清除能力可能有较大的贡献。

3 种体外抗氧化实验表明海蒿子提取物的3个多酚组分均具有很好的抗氧化活性。Pearson相关性分析表明海蒿子多酚的总酚含量与DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除能力有很高的相关性，其r值分别为－0.729和－0.759。多酚是海蒿子中最主要的抗氧化剂。槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸、咖啡酸衍生物和6-姜酚均已被报道具有很强的抗氧化活性，且这些化合物在海蒿子多酚组分中均具有很高的响应值，其可能对胞外抗氧化活性有较大的贡献。

由图4可知，当FP和EP的质量浓度低于0.5 mg/mL时，细胞存活率均高于80%，表明这2个组分对细胞基本没有毒性。当GP质量浓度达到1 mg/mL时，细胞存活率仍然接近80%，表明其质量浓度低于1 mg/mL对HepG2细胞基本没有毒性。同样，槲皮素在低质量浓度的条件下对HepG2细胞也没有毒性。因此，细胞抗氧化实验中FP、EP和GP的质量浓度范围分别为0～0.5、0～0.5 mg/mL和0～1 mg/mL。

如表2所示，GP的CAA值最高，为18.18 μmol/g；FP和EP组分次之，分别为13.70 μmol/g和14.08 μmol/g，且两者之间不存在显著性差异（P＞0.05）。海蒿子各多酚组分的CAA值与总酚含量、DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除能力的相关性系数分别为0.904、－0.941和－0.958，表明多酚是海蒿子中主要的细胞抗氧化剂，且胞外抗氧化活性也能反映细胞抗氧化活性的强弱。6-姜酚、苯甲酸衍生物和槲皮素的糖苷衍生物均已被发现对HepG2细胞有很好的抗氧化活性，这些化合物在海蒿子多酚组分中的峰响应值均较高，其可能起到主要的作用。

如图5所示，海蒿子中的3 种多酚组分均具有很强的α-葡萄糖苷酶抑制活性，且都呈剂量依赖性。3 种多酚组分的α-葡萄糖苷酶抑制活性均显著强于阿卡波糖。EP的活性最强，IC₅₀值为27.09 μg/mL，是阿卡波糖活性的19.7 倍，其次是FP组分（IC₅₀=78.75 μg/mL），GP组分则较弱（IC₅₀=302.58 μg/mL）。因此，α-葡萄糖苷酶是海蒿子多酚降血糖的重要靶点。先前的研究发现海蒿子多酚提取物中的高活性α-葡萄糖苷酶剂包括6-姜酚、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸和咖啡酸二十六酯己糖，这些化合物在3 个多酚组分质谱图中均具有较高的响应值，表明其是海蒿子多酚中主要的降血糖成分。

由图6可知，海蒿子多酚组分的Lineweaver-Burk曲线呈现出很好的线性关系，均交于第2象限，表明其对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均属于混合型，即海蒿子多酚组分既可与α-葡萄糖苷酶结合，又可与α-葡萄糖苷酶-底物结合。如表3所示，当反应体系中不存在海蒿子多酚组分时，α-葡萄糖苷酶的K_m和V_max值分别为0.174 mmol/L和0.207ΔA₄₀₅/min。随着海蒿子多酚组分质量浓度的提高，α-葡萄糖苷酶的V_max值不断降低。当FP、EP和GP的质量浓度分别达到60、20 μg/mL和160 μg/mL时，α-葡萄糖苷酶的V_max’值分别下降至0.034、0.040 ΔA₄₀₅/min和0.034ΔA₄₀₅/min。FP、EP和GP的K_i 值分别为9.872、1.444 μg/mL和24.491 μg/mL，其K_is值分别为15.012、27.09 μg/mL和28.817 μg/mL。K_i 值小于K_is值，表明海蒿子多酚组分与α-葡萄糖苷酶的结合能力强于α-葡萄糖苷酶-底物复合物。K_i 和K_is值越低表示抑制剂对α-葡萄糖苷酶的抑制活性越强。因此，从中也可得出EP对α-葡萄糖苷酶的抑制能力最强。