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肉源大肠杆菌与假单胞菌混合菌膜形成及其在钢片-肉表面转移研究

本报告以肉源优势腐败菌假单胞菌和常见污染菌大肠杆菌为对象，研究两菌在15°C、25°C混合菌膜形成及其在钢片-肉表面转移。（1）在胰蛋白胨大豆肉汤（tryptic soy broth，TSB）中混合菌膜形成时不同菌株组合和两种温度下交互作用不尽相同，成膜能力较强菌株更具有竞争优势；扫描电子显微镜（scanning electron microscope，SEM）结果与培养计数变化情况基本相符。（2）在肉渗出液、动态和静态培养下混合菌膜形成，发现交互作用更多呈现为抑制效应，且主要是大肠杆菌抑制假单胞菌；动态培养和50%肉渗出液对菌膜形成更多发挥了促进作用。激光共聚焦显微镜（confocal laser scanning microscope，CLSM）、SEM结果及相关成膜基因表达差异与培养计数变化情况基本相符。（3）基于肉表面混合菌膜形成，15℃主要表现为大肠杆菌受抑制，25℃主要表现为假单胞菌受抑制，CLSM、SEM结果及相关基因表达差异与培养计数变化情况基本相符。（4）菌膜单次转移发现，不同菌株组合、成膜温度和时间影响菌膜在钢片-肉表面的转移，15℃混合菌膜转移率高于单种菌膜，而25℃则相反，CLSM直观验证了表面接触导致肉表面细菌污染；通过连续印迹法利用数学模型拟合发现，典型Logistic模型、指数模型和多次方模型均可较好模拟单种菌膜和混合菌膜在钢片-肉表面的转移规律，其中典型Logistic模型拟合效果最好。本研究可为肉类微生物风险评估和污染控制提供科学依据。