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韭菜酸性磷酸酶的分离纯化及酶学性质
来源:食品科学网 阅读量: 104 发表时间: 2017-06-07
作者: 孙 芳,任美凤,胡瑞斌,唐云明
关键词: 韭菜;酸性磷酸酶;分离纯化;性质
摘要:

取新鲜韭菜,通过匀浆、缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得韭菜中所含的一种电泳纯的酸性磷酸酶(ACP)。经纯化后的酶溶液比活力为645.83U/mg,纯化倍数达到454.81倍,回收率为10.50%。酶学性质研究表明:该酶的分子质量约为58.97kD;最适反应温度和pH值分别为65℃和5.4;该酶对对硝基苯磷酸二钠(pNPP)的Km值为0.896×10-3mol/L;较高浓度的Mg2+、Mn2+对该酶的激活作用更强;抗坏血酸、甲醇、乙醇、氯仿、异丙醇、Cu2+、Ag+的浓度越大,对该酶的抑制作用越强。

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