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—— 中国食品杂志社
目的：建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法：以羧基化荧光微球作为标记物，共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体，将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线，以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果：通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液，抗体偶联微球量为100μg/mg，试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测，肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL，借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外，与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论：大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点，为该菌的检测提供了一种新型的手段。
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