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海参肠乙酰胆碱酯酶亲和层析洗脱条件的优化
来源:食品科学网 阅读量: 102 发表时间: 2017-06-07
作者: 杜 英,朱蓓薇,吴海涛*
关键词: 海参|乙酰胆碱酯酶|亲和层析| 洗脱条件
摘要:

以3-羧基苯基-乙基二甲基铵为配基,与溴化氰活化琼脂糖凝胶交联制备亲和层析柱,分离海参肠中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE),对其洗脱条件进行优化。结果显示:其适宜平衡体系为含0.3mol/L NaCl的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液,适宜洗脱体系为含0.2mol/L四乙基碘化铵的PBS(0.05mol/L,pH7.4)缓冲溶液。此条件下,海参肠AChE可得到较好的吸附和分离,初步纯化后的AChE经Native-PAGE电泳分离出3条具有酶活性的条带,说明AChE在海参肠内可能以多种形式存在,呈现多态性。

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