选用人肠上皮细胞Henle-407作为模型,经鼠伤寒沙门氏菌感染后提取其分泌的外泌体,利用Label free相对定量蛋白质组学方法探究外泌体内宿主细胞蛋白质组的变化。结果表明,在鼠伤寒沙门氏菌感染或未感染的宿主细胞外泌体中共鉴定到宿主蛋白质2 490 种,其中包括321 种差异表达蛋白。在该321 种蛋白中,共有蛋白有7 种,包括3 种表达上调蛋白和4 种表达下调蛋白。相比于共有蛋白,314 种蛋白属于非共有蛋白,即与未感染组外泌体相比,在感染组外泌体中特异性存在的宿主蛋白有9 种,而缺失的宿主蛋白却多达305 种。基因本体论分析表明差异蛋白主要分布于细胞器、细胞膜等细胞组分,参与代谢和生物调节等生物学过程,与结合、催化和转运等分子功能有关。京都基因与基因组百科全书分析表明差异蛋白主要富集在17 种代谢通路中。通过比较鼠伤寒沙门氏菌感染与未感染组外泌体内宿主来源的蛋白质组学数据变化发现,鼠伤寒沙门氏菌感染除了改变少部分共有蛋白的表达以外,同时会导致大量宿主细胞来源的蛋白质在外泌体中急剧减少。外泌体作为一种粒径在30~150 nm的双层膜囊泡,在空间有限的情况下,推测沙门氏菌可能通过某种未知机制抑制了宿主细胞蛋白向外泌体中的转运,而沙门氏菌的特异性蛋白和脂多糖等成分进入外泌体内,通过改变邻近宿主细胞对沙门氏菌的易感性进而帮助沙门氏菌在宿主细胞中的感染和扩散。
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