以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,固定β- 半乳糖苷酶对β- 半乳糖苷酶的固定化条件及固定化酶的各种性质进行研究,确定酶固定的最适条件为:用pH6.5 的P-E-M 缓冲液浸泡10h,25℃壳聚糖微球与0.5% 戊二醛交联12h 以上,4℃下酶与壳聚塘微球固定12h 以上,酶活力回收率可达67%。固定化酶的最适温度为40℃左右,最适pH7.0。通过双倒数法求回归方程,求得酶动力学参数Km 值为0.613 mmol/ml。固定化酶稳定性好,可以重复使用。将该固定化酶应用于乳糖分解实验和作为柱层析介质连续分解乳糖,分批反应6 批次,乳糖水解率保持在90% 以上,连续水解20d,乳糖水解率仍然可保持在75% 以上。
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