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铜诱导华溪蟹金属硫蛋白的分离纯化
来源:食品科学网 阅读量: 104 发表时间: 2017-06-07
作者: 马文丽, 王兰
关键词: 铜; 河南华溪蟹; 金属硫蛋白; 分离纯化;
摘要:

采用体外铜暴露法对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)进行处理,诱导金属硫蛋白(metallothionein,MT)的高效表达。取肝胰腺组织匀浆、冷冻离心,采用丙酮沉淀粗提(50%~80%),然后将MT粗提液依次经过Sephadex G-50凝胶过滤层析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、透析脱盐、冷冻干燥,分离纯化MT,并进行洗脱峰的紫外光谱扫描分析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE)及质谱分析。结果表明:得到了纯度较高的华溪蟹MT,主要以单体及二聚体形式存在,其分子量为6882D。

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