目的:对现行纸片扩散法(K-B法)检测天然抗菌成分存在显著误差的原因进行分析,提出改进方法。方法:采用氯化三苯四氮唑(TTC)对指示菌显色、分析天然产物乙醇浸膏中抗菌成分的极性、样品在平板培养前适当扩散等方法,对K-B法检测天然抗菌成分存在显著误差的原因进行了研究。结果:天然产物中存在中极性、弱极性甚至非极性抗菌成分,在培养基中扩散较慢,现行K-B法以透明抑菌圈为判读抗菌活性依据,会低估样品抗菌活性,甚至出现假阴性结果,造成漏筛。以不能被TTC显色的指示菌范围和透明抑菌圈之和来判读天然产物抗菌活性,提高了K-B法检测天然抗菌成分的准确性和可靠性。结论:现行K-B法不能直接应用于由有机溶剂提取的天然抗菌成分的活性检测,TTC显色K-B法可有效消除由样品扩散速度较慢引起的显著误差。
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