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乙醇脱氢酶I基因敲除的酿酒酵母重组菌构建的初步研究
来源:食品科学网 阅读量: 95 发表时间: 2017-06-07
作者: 葛菁萍, 宋刚, 宗祥, 凌宏志, 蔡柏岩, 刘松梅, 平文祥
关键词: 酿酒酵母; 基因敲除; 乙醇脱氢酶I;
摘要:

本实验根据酿酒酵母乙醇代谢途径,构建一株低乙醇产量的酿酒酵母基因工程菌株,以满足人们对低醇啤酒的需要。利用抗性基因筛选基因敲除突变体的方法,通过引物L1和L2扩增潮霉素B基因(两翼与酿酒酵母同源),按常规醋酸锂法转化酵母细胞后,筛选标记与酵母adhI基因发生同源重组,得到一株ADHI酶活性降低的工程菌株。发酵实验结果表明,转化菌株乙醇含量平均值为1.8%(V/V),较原始菌株低了65%。说明转化菌株体内乙醇生成途径受到干扰。

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