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草鱼胰蛋白酶的亲和纯化及酶学性质
来源:食品科学网 阅读量: 111 发表时间: 2021-07-13
作者: 李晨,高柳芳,崔晓东,韩宇航,朱丹旭,李娇
关键词: 草鱼;胰蛋白酶;亲和纯化;酶学性质
摘要:

从草鱼肝胰腺中提取胰蛋白酶,经匀浆、硫酸铵分级沉淀、透析得到胰蛋白酶粗酶液,通过BTI-Sepharose亲和层析一步纯化得到电泳纯的草鱼胰蛋白酶,并进一步研究该胰蛋白酶的酶学性质。结果表明:草鱼胰蛋白酶的分子质量约为27 kDa,米氏常数Km为3.4×10-5 mol/L;最适反应温度为60 ℃,在低于60 ℃条件下稳定;最适pH值为9.5,酸碱耐受范围为pH 6.0~12.0;Ba2+、Mg2+、Fe2+在0~10 mmol/L范围内对该酶具有一定激活作用,而乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)、K+在0~10 mmol/L范围内对该酶有一定抑制作用,EDTA较K+对酶的抑制作用更明显。

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