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产β-D-半乳糖苷酶马克斯克鲁维酵母的分离鉴定及其产酶特性
来源:食品科学网 阅读量: 93 发表时间: 2020-01-20
作者: 郑义,张健,曹永强,赵笑,余志坚,陈超,杨贞耐
关键词: 藏灵菇;β-D-半乳糖苷酶;发酵条件;分离纯化;酶学性质;低聚半乳糖
摘要:

从藏灵菇中分离筛选到的一株高产β-D-半乳糖苷酶菌株ZX-5,经ITS DNA序列分析,鉴定为马克斯克鲁维酵母。对产酶培养基的最佳碳源和氮源优化结果为半乳糖2.0%,胰蛋白胨1.0%;产酶优化条件:温度30 ℃,培养基初始pH 6.5,装液量30%,转速100 r/min,接种量2.0%,发酵36 h。粗酶液酶活力为2.60 U/mL;经硫酸铵分级沉淀和DEAE离子交换层析,获得纯化酶的比活力为157.35 U/mg。酶最适反应温度35 ℃,最适pH 6.0,在20~40 ℃和pH 5.0~7.0的范围内酶的稳定性较好;Mn2+对酶的活性有促进作用。利用菌株ZX-5 β-D-半乳糖苷酶分解乳糖并合成低聚半乳糖(galacto-oligosaccharide,GOS),在35 ℃、乳糖质量浓度60 g/100 mL、酶浓度1.0 U/mL条件下,乳糖水解率达68.34%(50 h),GOS产率达34.70%(40 h),具有潜在的应用前景。

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