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mok E基因过表达对红曲霉Monacolin K产量、菌丝及孢子形态的影响
来源:食品科学网 阅读量: 97 发表时间: 2019-09-26
作者: 林琳,王昌禄,李贞景,陈勉华,武淑芬,任志远
关键词: 红曲霉|基因过表达|Monacolin K|逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应|扫描电镜|孢子
摘要:

红曲霉中mok E基因是红曲霉次级代谢产物Monacolin K生物合成的一个相关基因,mok E基因表达量与Monacolin K产量呈正相关。以mok E基因为目的基因,构建红曲霉mok E基因过表达工程菌株,通过逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)确定mok E基因过表达转化子,对转化子Monacolin K产量进行测定,同时利用扫描电镜,对野生型红曲霉M1及转化子菌丝、孢子进行观察。结果表明:以潮霉素抗性基因为筛选标记,成功得到240?个转化子,对其中9?个转化子进行mok E基因表达量测定,有3 株转化子mok E基因表达量增加,分别为T2、T8、T9转化子,确定其为mok E基因过表达转化子;T2、T8、T9转化子内酯型Monacolin K产量分别为2?159.7、4?177.6、3?365.7?μg/g,与野生型红曲霉Monacolin K产量(1 447.8 μg/g)相比,分别提高了49.2%、188.5%及132.5%。扫描电镜结果显示,mok E基因过表达,对红曲霉的菌丝体、孢子形态及生殖方式均有影响。

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