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—— 中国食品杂志社
为研究糖酵解关键酶果糖-6-磷酸-2激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶（6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6- bisphosphatase，PFK-2/FBPase-2）基因转录水平与宰后肉品质间的关系，根据猪PFK-2/FBPase-2 mRNA序列 （GenBank登录号：NM_001143721.1）设计一对特异性引物并选择β-actin作为内参基因，构建含有各自序列的重组 质粒标准品，通过对反应条件的优化，建立了荧光定量实时-聚合酶链式反应技术检测猪PFK-2/FBPase-2基因转录 水平的方法。结果表明，所建立的方法线性关系好，目的基因与内参基因R2均大于0.999；灵敏度高，两基因检出 下限均为10 拷贝/μL；特异性好，扩增产物均有特异性单一峰。同时根据标准曲线计算可知目的基因与内参基因的 扩增效率分别为104.5%和104.0%，扩增效率接近一致，可对PFK-2/FBPase-2转录水平进行相对定量。本研究选取 PSE肉产生程度不同的三元杂交猪、杜洛克猪和太湖猪，利用建立的方法对不同品种猪宰后45 min背最长肌中PFK- 2/FBPase-2 mRNA转录水平进行测定，结果表明，太湖猪转录水平最高、杜洛克次之、三元杂交猪最低，且3 个品 种间有显著性差异（P＜0.05）。
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