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限制性内切酶酶切确证河豚鱼成分PCR检测结果
来源:食品科学网 阅读量: 105 发表时间: 2017-06-07
作者: 曲良苗,陈文炳,缪婷玉,邵碧英,彭 娟,江树勋
关键词: 河豚鱼;PCR检测;限制性内切酶;DNA测序;结果确证
摘要:

动植物成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测往往出现假阳性结果,为了有效排 除河豚鱼成分检测中出现的假阳性现象,提高检测结果的准确性,应用河豚鱼PCR检测引物进行河豚鱼成分的PCR 检测与限制性内切酶NmeA Ⅲ酶切确证实验。18 个供试样品中3 个样品无PCR扩增产物,判为阴性结果,15 个样品 初步判为疑似阳性。应用限制性内切酶NmeA Ⅲ对疑似阳性样品的PCR产物进行酶切与电泳分析,电泳图谱与河豚 鱼阳性对照不同的2 个样品,判定为假阳性结果,电泳图谱与阳性对照相同的4 个未知学名的河豚鱼加工样品,确 证为阳性结果,即检出河豚鱼成分,PCR产物序列经GenBank同源性序列查询比对(BLAST)予以验证,建立了简 便的河豚鱼成分PCR检测结果确证方法。

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