为研究活的非可培养状态(viable but nonculturable state,VBNC)的Escherichia coli O157:H7的复苏能力,将E.coli O157:H7分别置于LB液体培养基和生理盐水在-18℃低温条件下诱导生产活的非可培养状态E.coli。结合吖啶橙荧光显微镜计数法、活菌直接计数法和平板计数法对样本细菌检测验证,分别在第15天和第18天得到VBNC样本。采用将培养液直接升温到37℃、加入体积分数为25%酵母浸膏(25℃)和加入体积分数为8%吐温-80(37℃)3种方法进行复苏研究。同时利用荧光定量PCR技术监测从诱导到复苏整个过程中的菌数变化。结果显示:3种方法均能使VBNC状态E.coli O157:H7在2d内复苏,复苏后菌株与正常菌株形态类似;细菌进入VBNC状态15d后,采用相同的方法则无法复苏。
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