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—— 中国食品杂志社
采用壳聚糖絮凝和戊二醛交联的方法，对表达生产Thermobifida fusca葡萄糖异构酶(GIase)的重组大肠杆菌细胞进行固定化工艺研究，以期获得高性能和低成本的固定化产酶细胞方法。考察影响细胞絮凝和交联的各种因素，并对固定化酶制剂的理化性质、动力学常数进行测定。结果表明：最佳的固定化条件为在高密度发酵液中添加0.6%硅藻土和5mmol/L Mg2+，经60℃热处理30min后，在壳聚糖终质量分数0.1‰、pH5.5、充分搅拌条件下絮凝，酶活回收率达98%；絮凝产物在戊二醛体积分数0.25%、pH6.5、轻微搅拌条件下交联3h，以未交联的样品作参照(100%)，交联样品的酶活保留率达80%。相对于游离GIase，此条件下制备的固定化GIase的最适温度仍为80℃、最适pH值从10降低至9；在工业生产应用条件下，固定化GIase的初始酶活力达到356U/g，半衰期为61d，能够满足高果糖浆工业的生产要求。
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