目的:以采后黄冠梨为试材,系统研究梨果实在贮藏期间柠檬酸代谢调控机制,以及不同处理对柠檬酸代谢酶和基因表达特性的影响。方法:采用氯化钙和壳聚糖涂膜处理梨果实,利用高效液相色谱法(HPLC)测定果皮和果肉中柠檬酸含量的变化,同时测定在贮藏期内柠檬酸合酶(citrate synthase,CS),细胞质乌头酸酶(cytoplasmic aconitase,cyt-ACO)以及异柠檬酸脱氢酶(NAD-isocitrate dehydrogenase,NADP-IDH)活性变化,通过实时荧光定量PCR技术分析柠檬酸代谢酶基因的相对表达水平,并对三者进行显著性和相关性分析。结果:氯化钙和壳聚糖涂膜处理黄冠梨果实可以有效地延缓柠檬酸的降解(P<0.05)以及改善代谢酶的活性(P<0.05),两种处理在一定程度上影响了柠檬酸代谢酶基因的表达。柠檬酸合酶(CS)对柠檬酸的积累有显著的正相关性(P<0.05),cyt-ACO与果肉中的柠檬酸代谢呈显著正相关性,对果皮中柠檬酸呈现负相关,而NADP-IDH对柠檬酸代谢影响很小。基因表达特性与相应酶活变化呈一致性,从而调控柠檬酸代谢。因此,采后黄冠梨果实柠檬酸的代谢受到酶活以及基因水平的共同调控,氯化钙和壳聚糖涂膜处理在一定程度上影响酶的活性以及基因的表达水平。
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