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从毕赤酵母中提取外源重组蛋白的超声破碎条件及优化
来源:食品科学网 阅读量: 114 发表时间: 2017-06-07
作者: 戴佳锟,,李 燕4,马 齐,关正君,张 超,张艳婷,赵荣荣,尉亚辉,*
关键词: 毕赤酵母|超声破碎法|人脂联素蛋白|Western Blotting免疫印记技术
摘要:

建立适用于从毕赤酵母菌中提取外源重组蛋白的超声破碎方法。采用Western Blotting免疫印记技术检测从毕赤酵母菌中提取的外源人脂联素蛋白活性,并以外源人脂联素蛋白活性作为考察指标,采用单因素和L9(33)正交试验设计,对超声破碎条件进行优化。结果表明:在外源人脂联素蛋白活性最高的情况下,超声破碎条件为超声破碎功率450W、时间25min、时间间隔(工作时间:间歇时间)10:10(s/s),此时细胞破碎率为(67.8±2.1)%。若在超声破碎时添加1mmol/L PMSF,虽对细胞破碎率并无显著影响,但外源人脂联素蛋白活性将会明显增高。

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