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荞麦过敏原特异性抗体酶联免疫吸附法检测试剂的制备
来源:食品科学网 阅读量: 128 发表时间: 2017-06-07
作者: 张 昕,崔晓东,王转花
关键词: 苦荞|过敏蛋白|试剂盒|间接酶联免疫吸附法
摘要:

以天然苦荞过敏蛋白包被聚苯乙烯微孔板,以鼠抗人IgE抗体标记辣根过氧化物酶,以间接酶联免疫吸附法(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,IELISA)检测病人血清中的特异性抗体,分析并建立关键操作步骤及反应条件。结果表明:ELISA反应的最适工作条件为包被的抗原质量浓度100μg/mL、阳性血清稀释度1:50、酶标二抗稀释度1:1000,37℃时封闭的最佳时间为40min,包被抗原与阳性血清中抗体的最佳作用时间为40min,阳性血清与酶标二抗的最佳作用时间为40min。本方法具有良好的特异性、重复性和精密度。

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