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—— 中国食品杂志社
以黑曲霉Aspergillus niger基因组DNA为模板，PCR扩增出酸性α-淀粉酶的结构基因，将此基因插入载体pPIC9K，重组质粒pPIC9K-asAA转化毕赤酵母SMD1168，并通过G418平板培养基筛选高拷贝转化子。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下，酸性α-淀粉酶大量表达并分泌到胞外，该酶的表达受甲醇的严格调控和诱导，摇瓶培养中，2%甲醇诱导培养168h后酶活力达到最大值2838U/mL。SDS-PAGE结果显示该重组酶的分子质量为58kD。该酶的最适反应pH值为4.0，在pH3.0～6.0之间酶活力基本保持稳定，最适反应温度为70℃，在工业生产常用温度50℃条件下，该酶能够长时间保持稳定，并具有较高的酶活力。重组毕赤酵母遗传稳定性良好。
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