依据Enterocin A的氨基酸序列,设计半胱氨酸替换突变体Enterocin A(C14S)和Enterocin A(C47W),通过大肠杆菌表达系统获得重组突变体。用还原剂β-巯基乙醇处理MBP-Enterocin A。采用琼脂扩散实验检测重组Enterocin A、突变体及还原产物的抗无害李斯特菌LIN3活性。结果表明:N末端融合部分不含有半胱氨酸的MBP-Enterocin A或His tag-Enterocin A均表现强抗菌活性;而N末端融合部分含有半胱氨酸的GST-Enterocin A,表现很弱的抗菌活性;半胱氨酸替换突变体及MBP-Enterocin A还原产物均不显示抗菌活性。实验结果证明二硫键为Enterocin A活性的重要影响因素。
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