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标准分子构建及其在转基因玉米59122定量检测中的应用
来源:食品科学网 阅读量: 115 发表时间: 2017-06-07
作者: LU Jiao,YANG Rong,HUANG Kun-lun,ZHAO Wei-wei,LUO Yun-bo,YUAN Yan-fang,XU Wen-tao
关键词: 品系特异性;实时荧光PCR;转基因玉米;标准分子
摘要:

根据转基因作物59122 的外源基因与玉米基因组之间的左侧侧翼序列设计具品系特异性的荧光探针及引物,以实时荧光PCR 技术建立59122 的品系特定量检测方法,以重组PCR 技术成功获得了标准分子(整合了内标基因序列与左侧翼序列)梯度范围为101~105,定量范围为0.01%~100%;建立了玉米内源基因与侧翼序列的标准曲线,变异系数CV 值、标准偏差SD 以及相关系数R2 均可接受;检测5 个已知转基因含量(0.1%、0.5%、1%、2%、5%)的混合样品中的转基因含量,结果分别为0.12%、0.56%、1.04%、1.61%、4.66%,实验误差小于25%,结果可信。

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