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有机磷农药三唑磷单克隆抗体制备及鉴定
来源:食品科学网 阅读量: 106 发表时间: 2017-06-07
作者: 韦倩妮,黄魁英,雷红涛 ,樊晓博,孙远明,徐振林,王 弘,沈玉栋,徐怀德
关键词: 三唑磷|单克隆抗体|酶联免疫吸附检测
摘要:

采用活泼酯法和混合酸酐法将三唑磷半抗原(TZPM-Hap)与牛血清蛋白(BSA)和卵血清蛋白(OVA)偶联,分别制备出一种免疫抗原(TZPM-A-BSA)和两种包被抗原(TZPM-A-OVA 和TZPM-M-OVA)。通过免疫小鼠及细胞融合,并对杂交瘤细胞进行经多次筛选和亚克隆得到1 株产三唑磷单克隆抗体阳性细胞株(FC3),其抗体亚类为IgM。辛酸- 硫酸铵沉淀法纯化后的抗体经间接ELISA 检测,该方法IC50=9.7μg/L,最低检测限(LOD)为1.0μg/L,定量检测线性范围(IC20~IC80)为2.5~100.0μg/L,与其他有机磷农药结构类似物无明显交叉反应,显示出高度的特异性。该抗体可进一步用于免疫分析试剂盒开发。

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