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一种5 重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立
来源:食品科学网 阅读量: 149 发表时间: 2021-12-31
作者: 董立明,杨帆,邢珍娟,李葱葱,闫伟,龙丽坤,李飞武
关键词: 转基因水稻;筛查元件;单一实时聚合酶链式反应;5 重实时聚合酶链式反应;高通量检测方法
摘要:

以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5 种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了5 重real-time PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点,可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。

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