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VEGF基因油体表达系统构建及对拟南芥的遗传转化
来源:食品科学网 阅读量: 116 发表时间: 2017-06-07
作者: 李洪志,庞实锋,李海燕,薛 萍刘秀明,李 营,李 巍,肖艳双,李校堃
关键词: 油体|血管内皮生长因子全长基因(VEGF)|拟南芥|载体构建|植物生物反应器
摘要:

为研究油体系统在植物中表达外源蛋白的优势,以油菜总DNA 为模板,通过PCR 得到油菜油体(Ycoil)及启动子序列(Ycprm)。同时,将多对合成的寡核苷酸链,通过PCR 方法拼接得到血管内皮生长因子全长基因(VEGF)。以此为基础,构建Ycoil、Ycprm、VEGF 融合表达载体p1390Ycprm-Ycoil-VEGF。将重组质粒转入农杆 菌GV3101,并用花浸染法对拟南芥进行浸染。在含潮霉素(20mg/L)的1/2MS 培养基上筛选转基因拟南芥种子(T0),获得了T1 代抗性植株,通过PCR 检测、SDS-PAGE 检测和Western blotting 检测,结果表明油菜油体及血管内皮生长因子的融合基因已经转入拟南芥中,并成功得到表达,转化率约为0.1%。

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