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食品中三种致病李氏菌MPCR-DHPLC检测方法的建立
来源:食品科学网 阅读量: 118 发表时间: 2017-06-07
作者: 王 耀,曹际娟,*,闫平平,曹远银
关键词: 复合PCR- 变性高效液相色谱法(MPCR-DHPLC)|单核细胞增生李斯特菌|绵羊李斯特菌|英诺克李斯特菌|检测
摘要:

应用复合PCR(multiplex PCR,MPCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术建立食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的快速高通量检测方法。根据单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的特异基因序列分别设计引物,MPCR扩增的产物经DHPLC 技术进行快速检测。以94 株参考菌株做特异性实验,并开展了重现性检测实验。MPCRDHPLC方法同步检测到单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌的特异性阳性吸收峰,未检测到李斯特菌属其他近源种和非近源种参考菌株的阳性吸收峰,且重现性良好。该方法具有很好的特异性,可以快速、准确、高通量地检测食品中单核细胞增生李斯特菌、绵羊李斯特菌和英诺克李斯特菌,是食品微生物快速检测的新技术。

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