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卡那霉素酶联免疫检测方法的建立及检测条件的优化
来源:食品科学网 阅读量: 114 发表时间: 2017-06-07
作者: 刘丽强,华朱鸣,许定花,陈 伟,胥传来*
关键词: 卡那霉素|ELISA|抗体|直接竞争|间接竞争
摘要:

制备卡那霉素的多克隆抗体,建立了间接竞争ELISA 方法,并对间接ELISA 检测方法进行条件优化。结果表明:最佳实验条件是以PBS(0.01mol/L、pH7.4)作为包被液,以碳0.05mol/L pH9.6 酸缓冲液加0.1% 的酪蛋白封闭酶标板;最佳的抗体稀释液配方是PBST 溶液加4% 的聚乙二醇6000,溶液选取pH8.5 为佳,二抗稀释度选择1:3000,标准品稀释液则选择0.01mol/L pH7.4 的PBS 溶液。最终,卡那霉素的IC50 值为9.9ng/ml,最低检测限为1.0ng/ml,检测的线性范围为1~500ng/ml。

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