中国弯颈霉(Tolypocladium sinense)分离自冬虫夏草,其生长最适温度25~28℃,最适pH6~7。在液体培养基(葡萄糖 4%、蛋白胨 0.5%、酵母膏1%、KH2PO4 0.1%、MgSO4 0.05%)中,经过28℃下摇床(150r/min)培养4~10d 后,菌丝体生物量达8.49~9.73g/L。其菌丝体石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇和蒸馏水提取率分别为3.51%、1.62%、4.84%、23.33%,菌丝体多糖提取率为5.31%。各提取物对DPPH 自由基均具有清除作用,2mg/ml 多糖具有较强的清除作用,清除率为49.13%;菌丝体多糖(0.08mg/ml)能显著地清除羟自由基,清除率为82.5%。MTT 法检测发现乙酸乙酯提取物具有较强的抑制白血病细胞增殖作用;作用于K562 和SHI-1 细胞2d 后,乙酸乙酯提取物IC50 分别为26.55、17.75μg/ml;该提取物对正常细胞(人PBMC 和小鼠骨髓细胞)的抑制作用较弱;AO/EB 双染和TUNEL 法检测提示菌丝体的乙酸乙酯提取物可以诱导K562 细胞凋亡。上述实验结果表明,中国弯颈霉具有抗氧化和抗肿瘤方面的应用开发前景。
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