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青霉菌B01 产菊粉酶特性的研究及菊粉酶系分析
来源:食品科学网 阅读量: 114 发表时间: 2017-06-07
作者: 魏 微,刘兆普,*,王 琳,隆小华
关键词: 菊粉酶|酶学性质|活性聚丙烯酰胺凝胶电泳|薄层层析|高效液相色谱
摘要:

研究了pH 值、温度、底物浓度、金属离子对青霉菌(Penicillium sp.)B01 所产胞外菊粉酶活性的影响以及酶活随反应时间的变化情况。结果表明,pH4.6 时菊粉酶活力最大,最适反应温度是55℃。在pH3.6~5.4 的范围内,60℃以下酶活较稳定。Ca2+ 对菊粉酶有激活作用,而Cu2+ 对其活性强烈抑制。采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对该酶粗液进行蛋白质分析,获得较清晰的6 条蛋白谱带;2,3,5- 氯化三苯基四氮唑(TTC)活性染色结果显示,只有3 条谱带表现为具有菊粉酶活性。对酶解产物用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)法的分析结果,进一步证实这3 条谱带具有菊粉酶活性,并确定其主要为外切型菊粉酶,产物主要为果糖。

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