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水生栖热菌Thermus aquaticus FL-03嗜热麦芽糖转葡萄糖基酶基因的克隆及表达
来源：食品科学网 阅读量: 97 发表时间: 2017-06-07
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作者: 刘佳欢, 于寒松, 王玉华, 胡耀辉
关键词: 水生栖热菌FL-03； 麦芽糖转葡萄糖基酶； 基因克隆； 原核表达； 纯化；
摘要:

以水生栖热菌FL-03菌株的基因组DNA为模板,PCR扩增编码嗜热麦芽糖转葡萄糖基酶的基因(MalQ)片段,克隆至pET-28a(+)原核表达载体,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。重组蛋白经70℃钝化离心除杂蛋白后,经SDS-PAGE检测,可见单一条带。纯化酶液以10%麦芽糖为底物,经TLC法分析表明该酶具有转葡萄糖基的活性,比活力提高近5倍,且活力回收率达70%,具有重要的工业应用前景。

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