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—— 中国食品杂志社
目的:制备和鉴定小鼠抗鸡蛋清提取物单克隆抗体。方法:以纯化后的蛋清提取物为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选可特异性分泌抗蛋清提取物McAb的杂交瘤细胞。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定McAb的Ig类与亚类;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定McAb的特异性。结果:获得2株可稳定分泌抗蛋清提取物McAb的的杂交瘤细胞,分别命名为5E12和4F1,其分泌的McAb均为IgG1。Western Blotting分析表明,McAb 4F1所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为44kD。间接ELISA法检测两株McAb5E12、4F1的冻融前后效价分别为1:3000、1:300。结论:成功制备了两株抗蛋清提取物McAb、5E12和4F1,为变应原的提取、纯化及鉴定提供了有效的实验基础。
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