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淀粉酶基因的克隆及其在工业啤酒酵母中的表达
来源:食品科学网 阅读量: 110 发表时间: 2017-06-07
作者: 刘增然, 何秀萍, 龙章富, 张博润, 刘世贵
关键词: 工业啤酒酵母菌|淀粉酶|基因的克隆和表达|
摘要:

以扣囊复膜孢酵母菌总DNA为模板, 通过PCR扩增克隆到约1.5kb的α-淀粉酶基因(AMY)。用酵母菌穿梭载体YEp352为出发质粒,磷酸甘油酸激酶基因1(PGK1)启动子和乙醇脱氢酶基因1(ADH1)终止子为调控元件构建了含α-淀粉酶基因编码序列的酵母菌重组表达质粒pLA8。pLA8导入工业啤酒酵母菌,在以淀粉为唯一碳源的YNBS培养基上筛选阳性转化子,转化子培养液中α-淀粉酶活性为1.1U/ml,细胞破碎液的酶活性为0.3U/ml,而受体菌培养液及细胞破碎液中未检测到α-淀粉酶活性。

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