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利用CRISPRi技术构建乙醛酸生物合成Corynebacterium glutamicum工程菌
来源:食品科学网 阅读量: 107 发表时间: 2021-01-21
作者: 梁咏思,沈凯佳,范许云,韩武洋,李天明
关键词: 谷氨酸棒状杆菌;乙醛酸;规律间隔成簇短回文重复序列干扰;工程菌
摘要:

以谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)为出发菌株,敲除其支流代谢关键酶乳酸脱氢酶合成基因lldh,建立规律间隔成簇短回文重复序列干扰(clustered regularly interspaced short palindromic repeats interference,CRISPRi)调控体系,并利用该体系下调支流代谢中的关键酶异柠檬酸脱氢酶合成基因icd和苹果酸合成酶合成基因ms的表达强度,同时过表达异柠檬酸裂合酶合成基因icl,强化乙醛酸合成的通路。通过48 h连续监测工程菌和野生菌生长状况,并检测发酵终产物。结果显示:工程菌生长几乎不受影响,发酵液中乙醛酸质量浓度达到5 mg/mL,实现了乙醛酸的积累,为谷氨酸棒状杆菌工业生产乙醛研究提供一定的参考。

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