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—— 中国食品杂志社
借助pACYCDuet-1和pET28a双质粒共表达系统，构建携带Agrobacterium radiobacter来源扁桃酸消旋酶（Ar mandelate racemase，ArMR）、Lactobacillus harbinensi来源D-扁桃酸脱氢酶（Lh D-mandelate dehydrogenase，LhDMDH）和Exiguobacterium sibiricum DSM 17290来源L-亮氨酸脱氢酶（Es L-leucine dehydrogenase，EsLeuDH）编码基因的重组大肠杆菌，将其命名为E. coli BL21（DE3）/pACYCDuet-1-EsLeuDH-LhDMDH:pET28a-ArMR。在低温、低浓度诱导剂的诱导下，该重组菌成功表达了具有各自催化活性的3 种重组酶，其发酵液中LhDMDH、EsLeuDH和ArMR的活性分别为195.8、56.2 U/mL和174.5 U/mL。以诱导后的全细胞为催化剂、D,L-扁桃酸为底物，在D,L-扁桃酸初始浓度50 mmol/L、pH 9.5的500 mmol/L NH4Cl-NH3·H2O缓冲液体系下，180 r/min、30 ℃反应48 h后，L-苯甘氨酸得率可达77.48%，其对映体过量值大于99%。本研究具有较大的产业化潜力，为实现L-苯甘氨酸规模化的生物合成奠定了坚实的基础。
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