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犊牛盲肠微生物总DNA的提取方法
来源:食品科学网 阅读量: 117 发表时间: 2012-02-21
作者: 于萍, 王加启, 卜登攀, 邓露芳, 刘开朗, 魏宏阳, 周凌云,
关键词: 犊牛盲肠微生物; 细菌总DNA; PCR扩增; 超声波细胞破碎; 反复珠磨法;
摘要:

采用反复冻融法、玻璃珠法和超声波+反复珠磨的方法提取犊牛盲肠的微生物总DNA,并对以上三种方法进行比较,从中确定最佳的方法,以实现普通实验条件下成功提取符合PCR扩增要求的DNA。经紫外分光光度分析表明,超声波+反复珠磨的方法所得的DNA的A260/A280的比值为1.81,0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示,所提DNA片段分子量大于20 kb,适于酶解和PCR扩增要求。以提取的DNA样品为模板,利用细菌通用引物,对其16S rDNA进...

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