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牙鲆(Paralichthys olivaceus)中不同亚型小清蛋白的提纯与鉴定
来源:食品科学网 阅读量: 147 发表时间: 2019-09-26
作者: 孙礼瑞,林 洪,李振兴,赵金霞,林 航,罗 晨,田盛兰
关键词: 鱼过敏原|小清蛋白亚型|牙鲆|纯化|鉴定
摘要:

以牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象,以Tris、甘氨酸和二硫苏糖醇的混合溶液为提取液,加入不同量的硫酸铵分级纯化小清蛋白,应用免疫印迹法、酶联免疫法及质谱法进行鉴定。最终提纯得到3 种不同分子质量的蛋白(PVI、PVII和PVIII),所得蛋白纯度大于90%,血清学实验证明其与小清蛋白特异性IgG及IgE抗体均有结合能力,质谱鉴定得到PVII和PVIII分子质量分别为12 151 Da和11 645 Da,pI值分别为5.14和4.69。该方法满足牙鲆小清蛋白提取纯化要求,得到的3 种蛋白是牙鲆小清蛋白的不同亚型,且均具有过敏原性。

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