领学术科研之先，创食品科技之新
—— 中国食品杂志社
旨在实现嗜热毛壳菌（Chaetomium thermophilum）中的甘露聚糖酶CtMan26在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达，探究重组酶CtMan26的酶学性质及在甘露寡糖（mannooligosaccharides，MOS）制备中的潜力。甘露聚糖酶CtMan26共含448 个氨基酸，由碳水化合物结合模块CBM35、Linker及GH26家族的催化域模块组成，催化结构域上的Asp-395、Leu-396和CBM35辅助模块上的Leu-100受到多个疏水作用力，并可与Linker上氨基酸形成多个氢键。重组酶CtMan26经P. pastoris表达后，存在N-糖基化修饰，蛋白表观分子质量约为55 kDa。重组酶CtMan26的最适温度为55 ℃，最适pH值为5.0，50、60 ℃处理1 h后酶活力仍保持在90%以上，在pH 4.0～12.0范围表现出良好的稳定性。以魔芋甘露聚糖为底物时，重组酶CtMan26的比活力为23.15 U/mg，米氏常数为4.75 mg/mL，最大反应速度为27.17 μmol/（min·mg）。重组酶CtMan26制备的MOS主要为甘露糖（14.2 mg/L）、甘露二糖（20.1 mg/L）、甘露三糖（6.1 mg/L）和甘露四糖（2.5 mg/L）。进一步研究发现，制备的MOS表现出较好的抗氧化能力，当样品质量浓度为2.4 mg/mL时，对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除率、羟自由基清除率以及超氧阴离子自由基清除率分别为（90.80±0.65）%、（80.7±1.07）%、（69.10±1.10）%和（76.7±3.14）%。同时，MOS具有明显的益生元特性，能够抑制大肠杆菌（Escherichia coli）的生长，促进有益菌戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）和植物乳杆菌（Lactobacillu plantarum）的生长，且随着MOS添加量增加及培养时间的延长越发明显。综上所述，重组甘露聚糖酶CtMan26具有较好的酶学特性，在MOS的制备中具有潜在的应用价值。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
电话: 010-87293157
地址: 北京市丰台区洋桥70号
版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2
