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—— 中国食品杂志社
目的：对牛粪及牛肉中的非O157大肠杆菌进行分离、鉴定和毒力基因携带情况进行检测，以了解非O157大肠杆菌的污染状况。方法：参考USDA检测方法，对样品进行选择性增菌，用多重聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）方法进行初步筛选，检测O抗原（O157、O121、O111、O103、O26），阳性样本用选择性显色培养基rainbow agar分离纯化，可疑菌株用多重PCR方法鉴定O抗原，PCR-限制性片段长度多态性鉴定H抗原，并采用血清凝集实验进行验证，确认的阳性菌株采用多重PCR方法进行毒力基因（stx1、stx2、eae、hly）检测。结果：在153?份牛粪和49?份牛肉样本中，共40?份样品检出1?个或多个O血清型阳性，牛粪检出率高于牛肉，非O157阳性率为19.3%，O157的阳性率为0.50%；经分离纯化后，共鉴定出阳性菌株30?株，其中O26最多占73.3%，O121、O103、O157分别占16.7%、6.7%、3.3%。毒力基因检测结果显示，分离自牛肉的2?株O26:H11，一株stx1、hly阳性，另一株hly阳性，分离自牛粪的1?株O26:H11携带hly基因，因此30?株菌株中带毒菌株阳性率为10.0%，非O157产志贺毒素大肠杆菌阳性率为3.4%。结论：牛粪和牛肉中非O157大肠杆菌的污染率明显高于O157，尤其是O26:H11血清型最高，且检出含志贺毒素基因的大肠杆菌，这提示零售牛肉市场存在非O157大肠杆菌污染的安全风险，我国应该加强对非O157大肠杆菌的检测和监控。??
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