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—— 中国食品杂志社
该研究从酱香型白酒酒醅中取样,经过富集培养、氨基甲酸乙酯（EC）耐受驯化,结合溴甲酚紫显色法和氨基甲酸乙酯水解酶活力对比法筛选高产氨基甲酸乙酯水解酶菌株,利用形态学观察和分子生物学鉴定筛选菌株的种属,并对菌株进行耐酸性驯化,考察驯化对菌株的生长性能、产酶性能以及其所产EC水解酶的酶学性质的影响。结果表明,分离筛选得到一株高产氨基甲酸乙酯水解酶的菌株ECH-7,其被鉴定为季也蒙迈耶氏酵母（Meyerozyma guilliermondii）。在pH 3~6培养条件下,该菌株的最适生长和产酶环境pH均为6。对菌株ECH-7进行耐酸性驯化（从pH 6至5）,获得驯化后菌株ECH-7-驯,其进入稳定期（66 h）的OD600 nm值是未驯化菌株ECH-7的1.6倍。菌株ECH-7-驯培养63 h达到产酶峰值（80.2 U/L）,比未驯化菌株ECH-7最高酶活力提高了40.9%。菌株ECH-7和ECH-7-驯所产EC水解酶最适作用温度和pH一致,分别均为50 ℃、pH 5,且其水解作用温度及pH适应范围广。该酶在30~80 ℃条件下相对酶活均高于67.0%,在pH 3~6条件下相对酶活均保持在50%以上。
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