领学术科研之先，创食品科技之新
—— 中国食品杂志社
为提高巨大芽孢杆菌谷氨酸脱羧酶活性，通过定向进化技术对其进行酶工程改造。经过二轮易错聚合酶链式反应，从13 000 多个突变株中筛选到突变株A5-3、E2-4、E3-11，相对于野生型，其酶比活力提高了157%、115%、97%，且Kcat/Km都有所增大。其中A5-3氨基酸序列发生了2 个突变（A55D和D451E）。三维模拟结果表明，第55位丙氨酸突变为天冬氨酸很可能为酶促反应提供H＋，从而加快酶促反应效率；突变株E2-4第34位由亮氨酸突变成谷氨酰胺，一定程度上改善了酶的热稳定性；突变株E3-11的第325位由丙氨酸突变成丝氨酸有利于蛋白内部形成更多氢键，增大了该部位的柔性，更有利于氨基酸残基之间发生相互作用。圆二色谱分析表明，突变株与野生型具有相似的三维结构，相比于野生酶，突变酶的α-螺旋减少，无规则卷曲增加，说明突变酶刚性有所下降而柔性增加。利用定向进化技术可以明显改善谷氨酸脱羧酶的酶活性，为其工业化的应用提供实验参考。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
电话: 010-87293157
地址: 北京市丰台区洋桥70号
版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2
